2019年, 第40卷, 第2期　刊出日期：2019-04-15

  

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  枸杞多糖与性腺损伤的修复

  颜玲, 朱诗平, 边璐, 孙升云

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 95-100. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.001

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  枸杞多糖是枸杞的主要生物活性成分,其被证实具有保护生殖系统、免疫调节、延缓衰老、抗辐射及抗缺氧等功效.近年来枸杞多糖的多重药用价值备受中医药领域青睐,其中对生殖系统的保护作用是目前研究的热点,研究证实其可修复男性睾丸的损伤.本文就枸杞多糖的药用价值、男女性腺损伤的现状、枸杞多糖对男女性腺损伤的修复作用及其机制几方面进行综述.
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  脂多糖诱导成年大鼠心室肌细胞线粒体融合-分裂动力失衡模型的构建

  李红梅, 邝志强

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 101-108. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.002

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  目的: 探讨脂多糖(LPS)在体外诱导成年大鼠心室肌细胞线粒体融合-分裂动力失衡模型的构建方法.方法: Sprague-Dawley大鼠异氟烷麻醉后胸部正中切口取出心脏并连接于心脏灌流装置,用II型胶原酶(质量浓度为0.3 mg/mL)沿升主动脉逆行灌注消化分离心肌细胞,心肌细胞终止消化并复钙后进行逐级沉淀,加入M199(medium 199)培养基进行培养.对照组采用 M199培养基培养,模型组用含有不同质量浓度的LPS(10~1 000 ng/mL)培养.用免疫荧光染色方法标记心室肌细胞肌钙蛋白来观察心肌细胞的形态结构,并用不同质量浓度的LPS刺激心肌细胞,TUNEL法和AnnexinV/PI双染法检测心肌细胞凋亡情况,免疫荧光法测定心肌细胞中caspase-3和caspase-9的活性,Western blotting 法测定心肌细胞Bax、Bcl-2、细胞色素c(Cyt c)和线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)和视神经萎缩蛋白 1 (OPA1)以及线粒体分裂蛋白1 (Fis1)和线粒体动力蛋白 1(Drp1)的含量.结果: 免疫荧光染色显示培养的为长杆状存活的心肌细胞.与对照组相比,LPS诱导心肌细胞24 h,心肌细胞凋亡阳性细胞数和caspase-3和caspase-9活性较对照组显著增高;LPS组心肌细胞线粒体中促凋亡蛋白Bax及胞浆中Cyt c显著增高,而胞浆中抗凋亡蛋白Bcl-2显著降低;线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2和OPA1含量明显减少,而线粒体分裂蛋白Drp1和Fis1显著增多.结论: 质量浓度为10 ng/mL的LPS 可以显著诱导体外培养成年大鼠心室肌细胞线粒体融合-分裂动力失衡模型的建立.
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  高糖、低氧对大鼠心肌微血管内皮细胞新生功能影响的体外研究

  蔡梅峰, 崔永生, 何文凯, 李明琰, 应虹柳, 曾国鹏

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 109-116. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.003

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  目的: 探讨高糖、低氧对大鼠心肌微血管内皮细胞(CMEC)新生功能的影响.方法: 体外培养成年大鼠CMEC,随机分为4组:正常对照组(NG组)、高糖组(HG组)、低氧组(HNG组)和高糖+低氧联合组(HHG组).Real-time PCR法检测各组CMEC的HIF-1α、VEGF的mRNA表达水平;CCK-8法检测各组CMEC的体外增殖能力; transwell小室实验评价各组CMEC的迁移能力;体外小管形成实验评价各组CMEC的成管能力.结果: (1)HIF-1α的mRNA表达水平:NG组与HG组之间、HNG组与HHG组之间无统计学差异(P>0.05);HNG组明显高于NG组(P<0.05),HHG组明显高于HG组(P<0.05),表明低氧可促进CMEC的HIF-1α mRNA表达.VEGF的mRNA表达水平:NG组与HG组间无统计学差异(P>0.05),HNG组明显高于HHG组(P<0.05);HNG组明显高于NG组(P<0.05),HHG组明显高于HG组(P<0.05),表明高糖可抑制CMEC的VEGF mRNA表达,而低氧可促进其表达.(2)细胞的增殖能力:NG组明显高于HG组(P<0.05),HNG组明显高于HHG组(P<0.05);NG组明显高于HNG组(P<0.05),HG组明显高于HHG组(P<0.05),表明高糖、低氧均可抑制CMEC增殖.(3)细胞的迁移能力:NG组明显高于HG组(P<0.05),HNG组明显高于HHG组(P<0.05);NG组明显高于HNG组(P<0.05),HG组明显高于HHG组(P<0.05),表明高糖、低氧均可抑制CMEC迁移.(4)细胞的成管能力:NG组明显高于HG组(P<0.05),HNG组明显高于HHG组(P<0.05);NG组明显高于HNG组(P<0.05),HG组明显高于HHG组(P<0.05),表明高糖、低氧均可抑制CMEC小管形成能力.结论: 高糖对CMEC的HIF-1α mRNA表达的影响不明显,但可明显抑制CMEC的VEGF mRNA表达;低氧可促进CMEC的HIF-1α和VEGF mRNA表达;高糖和低氧均可降低CMEC的增殖能力、迁移能力和成管能力,两者联合时作用更为明显.
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  CENP-A在肝细胞癌中的预后意义和作用机制

  李锦忠, 谌宁, 王丹, 龚晓兵

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 117-128. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.004

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  目的: 研究着丝粒蛋白A(CENP-A)在肝癌(HCC)患者中的预后意义和作用机制.方法: 从癌症基因组图谱(TCGA)和Oncomine深入挖掘并整合了HCC相关的RNA测序数据集和已发表的研究,评估CENP-A的表达与其在HCC患者中的临床学意义和预后价值之间的关联.使用R语言对TCGA的HCC患者进行总体生存期(OS)和无复发生存期(RFS)的单因素和多因素Cox回归分析,并对CENP-A进行GO功能、KEGG通路的富集分析及蛋白互作网络分析.最后通过cBioPortal分析CENP-A遗传改变相关的潜在机制及对预后的影响.结果: 与正常肝组织相比,肝细胞癌(LIHC)中的CENP-A表达显著上调.在LIHC患者中,高CENP-A表达患者的OS(P=2.66E-07)和RFS(P=5.5E-05)显著劣于低表达者.单变量和多变量分析显示高CENP-A表达是LIHC患者OS(HR:2.266,95%CI:1.542-3.330,P=3.14E-05)和RFS(HR:1.605,95%CI:1.118-2.305,P=0.010)差的独立预后因素.CENP-A的功能分析提示:通过与BUB1,AURKA,AURKB,KIF2C,CDK1,TOP2A,HJURP等多种基因联合作用,CENP-A在DNA复制、错配修复、同源重组、基础切除修复和细胞周期等通路上影响动粒对染色体的移动及调节,进而干扰有丝分裂的细胞周期.在9%的LIHC病例中观察到CENP-A改变,扩增和mRNA上调是主要的改变类型,CENP-A改变的LIHC患者的OS(P<0.0001)明显更差.结论: 这些发现证实CENP-A可能是HCC中独立的预后生物标志物,并可能促进靶向精确肿瘤学的发展.
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  c-Myc蛋白对三阴性乳腺癌增殖迁移的影响

  李常有, 于志强, 崔军威, 杨满, 朱丽璋, 韦伟

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 129-134. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.005

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  目的: 研究c-Myc蛋白对三阴性乳腺癌增殖迁移的影响.方法: 应用shRNA进行慢病毒包装,构建低表达稳转株,再用westernblot验证敲低效果.利用MTT验证c-Myc蛋白对三阴性乳腺癌增殖的作用;应用划痕实验、Transwell Assay证明c-Myc蛋白在肿瘤转移中的影响. 结果: 在myc基因敲低后,c-Myc蛋白表达量明显降低,增殖能力明显下降,迁移能力变弱. 结论: c-Myc蛋白作为原癌基因的翻译产物对三阴性乳腺癌的增殖、迁移具有促进作用.
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  安神方颗粒对CUMS大鼠递质代谢与炎症反应的影响

  聂玲辉, 黄杰聪, 谢炜, 伍志勇

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 135-141. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.006

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  目的: 探讨安神方颗粒对慢性应激抑郁模型大鼠行为学以及递质代谢和炎症反应的影响.方法: 30只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、安神方颗粒组,每组10只;除空白组外,其余各组大鼠进行2周的慢性温和不可预知应激(CUMS)刺激;在后续3周进行CUMS 1 h前,安神方颗粒组每天给予安神方颗粒质量分数40 g/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃.观察各组大鼠治疗前后的体质量变化;运用强迫游泳(FST)和糖水偏好实验(SPT)评估大鼠抑郁行为的变化;通过ELISA 法检测大鼠海马组织中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,并通过Western blotting和免疫荧光检测大鼠海马BDNF和GABA_ARα2表达情况.结果: 与空白组比较,模型组大鼠体质量增加缓慢(P<0.01),FST累积不动时间明显延长(P<0.01),糖水偏好值减少(P<0.01),海马BDNF和GABA_ARα2表达水平下降(P<0.01);与模型组比较,安神方颗粒组大鼠体质量增长较快(P<0.01),FST累积不动时间明显缩短(P<0.01),糖水偏好值升高(P<0.01),海马组织中炎症因子IL-1β和TNF-α的含量降低,BDNF和GABA_ARα2表达水平上升(P<0.01).结论: 安神方颗粒可能参与干预炎症因子IL-1β和TNF-α上调海马组织BDNF和GABA_ARα2的表达,从而发挥抗抑郁的作用.
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  多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜细胞凋亡及VEGF-A的表达

  王立群, 周月希, 张娟

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 143-149. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.007

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  目的: 观察多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠子宫内膜细胞的凋亡情况以及VEGF-A的表达变化,探讨细胞凋亡及VEGF-A在PCOS子宫内膜发生功能失常的过程中的作用.方法: 大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠来构建PCOS模型,TUNEL法检测大鼠子宫内膜细胞凋亡情况、免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹法检测VEGF-A在大鼠子宫内膜中的表达情况.结果: TUNEL结果显示PCOS组大鼠子宫内膜细胞凋亡率较对照组明显降低(P<0.05);免疫组织化学结果显示VEGF-A在PCOS组大鼠子宫内膜腺上皮细胞中的表达较对照组明显减弱(P<0.05);蛋白质免疫印迹分析显示PCOS组大鼠子宫中VEGF-A蛋白的表达较正常对照组明显降低(P<0.05).结论: PCOS子宫内膜功能失常可能与子宫内膜细胞凋亡减少有关,VEGF-A表达下调可能是PCOS子宫内膜增生过度的一种代偿性作用.
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  ZP2蛋白在小鼠卵巢颗粒细胞中的表达

  谢妍, 迟恒, 乜春城, 曹佐武

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 150-155. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.008

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  目的: 在蛋白质水平确定小鼠卵巢的颗粒细胞内是否表达透明带蛋白.方法: 制作小鼠卵巢组织的冰冻切片,免疫荧光实验用抗ZP2抗体检测小鼠卵巢颗粒细胞中是否存在ZP2蛋白,荧光显微镜下对卵巢切片的荧光信号拍照,通过灰度分析评估小鼠卵巢的颗粒细胞中的荧光信号,检测小鼠卵巢颗粒细胞内的ZP2蛋白.结果: 实验组卵巢切片颗粒细胞区抗透明带ZP2抗体标记的荧光信号灰度值(1.88±0.57)明显比对照组(1.20±0.11)强.结论: 小鼠卵巢颗粒细胞也表达透明带ZP2蛋白.
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  大鼠肠系膜与肾被膜下移植胰岛治疗糖尿病的疗效对比

  程宇, 周丁华, 闫涛, 王进, 吕伟

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 157-164. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.009

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  目的: 探讨经大鼠肠系膜与肾被膜下移植胰岛在糖尿病治疗中的疗效对比与新路径.方法: 采用链脲佐菌素诱导SD大鼠制作糖尿病模型,随机分为肠系膜部胰岛移植组(肠系膜组)和肾被膜下胰岛移植组(肾被膜组),各18只.V型胶原酶消化供体大鼠胰腺,Ficoll密度梯度法分离、纯化胰岛,双硫腙和台盼蓝染色检测胰岛纯度和活性.移植术后于不同时间点监测两组大鼠血糖波动、血清C肽水平及腹腔糖耐量功能,记录胰岛存活时间并切取移植部位行HE染色观察组织形态学改变.结果: 每只供体大鼠获取(347.08±33.22)胰岛当量,胰岛纯度为(88.03±4.94)%,存活率为(90.55±3.98)%.两组大鼠血糖于移植后3 d降至正常水平,与移植前相比明显下降(P<0.05);高糖刺激实验表明,移植后10、31 d两组大鼠刺激后的血清C肽水平均较刺激前上升(P<0.05);腹腔糖耐量结果提示,两移植组大鼠糖耐受功能均良好(P>0.05);肠系膜组与肾被膜组移植胰岛的中位存活时间分别为61 d与46 d;HE染色显示移植部位可见伴生血管的成团胰岛细胞.结论: 经肠系膜移植胰岛能安全有效地发挥降糖作用,恢复糖尿病大鼠正常血糖水平,疗效优于肾被膜下移植.
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  非手术性牙周治疗改善肥胖伴牙周炎大鼠肾功能异常和氧化应激状态

  曾嘉皓, 吉春兰, 柴巧学, 钟素兰, 邹川, 倪佳, 陈蕾

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 165-173. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.010

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  目的: 观察非手术性牙周治疗对肥胖伴实验性牙周炎大鼠肾功能和氧化应激水平的影响.方法: 45只SD大鼠随机分为健康对照组、肥胖对照组、肥胖伴实验性牙周炎组和牙周治疗组.通过HE染色观察牙周和肾组织结构改变,并检测血清肌酐水平及肾脏的丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活力. 结果: 肥胖伴实验性牙周炎组的牙周组织破坏明显,肾小管上皮病理结构出现早期破坏.牙周治疗组的血清肌酐水平[(26.38±1.51)mmol/L]显著低于肥胖伴实验性牙周炎组(30.13±2.47)mmol/L(P=0.001).牙周治疗组肾脏的MDA(6.29±1.24)nM/mgprot、8-OHdG(0.32±0.14)ng/gprot水平显著低于肥胖伴实验性牙周炎组MDA(7.88±1.99)nM/mgprot、8-OHdG(0.50±0.26)ng/gprot(P<0.05);牙周治疗组肾脏的GSH水平[(55.85±7.26)μmol/gprot]显著高于肥胖伴实验性牙周炎组[(43.91±12.48)μmol/gprot](P=0.041);牙周治疗组的SOD活力与肥胖伴实验性牙周炎组的无统计学差异(P>0.05).结论: 非手术性牙周治疗可一定程度改善肥胖伴实验性牙周炎大鼠肾功能异常和氧化应激状态.
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  无症状期HIV感染者免疫状态与牙周指数的关系

  郭莹, 夏炜, 高琦, 李维弟, 王潇, 张燕升, 范忠, 陈世璋

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 174-178. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.011

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  目的: 探讨无症状期人免疫缺陷病毒(HIV)感染者免疫状态与牙周指数的关系.方法: 随机选取符合纳入标准的HIV感染者75例,分为轻、中度免疫抑制组.记录两组患者的年龄,检查牙周指数:菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI)和龈沟出血指数(SBI),检测外周血CD4+T淋巴细胞计数.结果: 对于无症状期HIV感染者轻、中度免疫抑制组,牙周指数因素在两组之间的差异均无统计学意义(P>0.05);PLI、GI和SBI三个指数与CD4计数之间无相关性.但随着SBI评分增加,HIV感染者免疫抑制加重的可能性增加.结论: 抗逆转录病毒疗法(HAART)治疗下的无症状期HIV感染者轻、中度牙周炎性病损较为常见,牙周指数与免疫状态之间没有相关性,SBI评分的升高提示无症状期感染者的免疫抑制状态可能加重.
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  环境因子对浮游动物休眠卵萌发的影响

  栾磊磊, 杨宇峰, 王庆, 高良敏

  暨南大学学报（自然科学与医学版）. 2019, 40(2): 179-186. https://doi.org/10.11778/j.jdxb.2019.02.012

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  目的: 探讨不同环境因子对浮游动物休眠卵萌发的影响,为亚热带河口浮游动物的潜在补充机制和群落演替规律提供基础数据.方法: 采集珠江口桂山岛海域表层沉积物,研究Cu、Zn、Cd、水温、盐度、酸碱度、冷藏时间和原位海区不同水深对休眠卵萌发的影响.结果: 随着Cu、Zn、Cd浓度的增加和处理时间的延长,休眠卵死亡率呈明显上升趋势;桂山岛海域沉积物中休眠卵在较宽的水温、盐度、酸碱度范围均可孵化;冷藏10个月后孵化的桡足类幼体数量显著高于冷藏半个月;位于原位海区0.5 m处沉积物中休眠卵的萌发量显著高于2 m处.结论: 重金属对沉积物中休眠卵的孵化有较大影响,毒性效应由大到小依次为Cd>Cu>Zn;桂山岛海域沉积物中休眠卵最适孵化条件为:水温25 ℃、盐度30、酸碱度8;低温冷藏刺激有利于桡足类休眠卵孵化;原位海区休眠卵孵化数量与光照强度呈显著正相关.